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高效液相色谱法分析头孢硫脒


本品为(6R  ,7R)-3[(乙酰基)甲基]-7-[α-(N  ,N’-二异丙基脒螺旋进料器硫基)-乙酰胺基]8-氧代-5-硫杂-1-氮杂双环[4.2.0]辛-2-烯-2-甲酸内铵盐 。按无水物计算  ,含C19H28N4O6S2不得少于94.0% 。
【性状】 本品矿用皮带机为白色或类白色结晶性粉末;几乎无臭  ,有引湿性 。
本品在水中极易溶解  ,在乙醇制砂机设备中微溶  ,在丙酮、氯仿或乙醚中不溶 。
比旋度 取本品  ,vwin德赢网官方下载称定  ,加水溶解振动电机并制成每1ml中含10mg的溶液  ,依法测定(中国药典2000年版二部附录Ⅵ E)  ,比旋度为135°~ 145° 。
【鉴别】 (1)在含量测定项下记录的色谱图中  ,供试品主峰的保留时间应与头孢硫脒对照品主峰的保留时间一致 。斜槽输送机
(2)取本品适量  ,加水溶解并制成每1ml中约含20mg的溶液  ,作为供试品溶液;另取头孢硫脒对照品适量  ,加水溶解并制成每1ml中约含20mg的溶液  ,作为对照品溶液;取对照品溶液和供试品溶液等量混合  ,作为混合溶液 。照薄层色谱法(中国药典2000年版二部附录VB)试验  ,吸取上述三种溶液各1μl  ,分别点于同一硅胶移动带式输送机G薄层板[取硅胶G2.5g  ,加含1%羧甲基纤维素钠的磷酸盐缓冲液(pH5.8)适量  ,调浆制板  ,经105℃活化1小时  ,放入干燥器中备用]上  ,以新鲜配制的甲醇-异丙醇-磷酸盐缓冲液(pH5.8)(7:2:1)为展开剂  ,展开后  ,晾干  ,于100℃加热30分钟  ,置碘蒸气中显色检视 。供试品溶液所显主斑点的颜色与位置应与对照品溶液的主斑点相同  ,混合溶液应显一个斑点 。
(3)本品的红外光吸收图谱应与对照品的图谱一致 (中国药典螺旋输送器2000年版二部附录Ⅳ C) 。
以上(1)电磁振动筛机、(2)两项可选做一项 。
重型板式给料机【检查】 结晶性 取本品少许  ,依法检查(中国药典2000年版二部附录Ⅸ D)  ,应符合规定 。
酸度 取本品  ,加水制成每1 ml中含0.1g的溶液  ,依法测定(中国药典2000年版二部附录Ⅵ H给料机)  ,pH值应为4.0~6.0 。
溶液的澄清度与颜色取本品5份  ,各0.6g分别加水5ml溶解后  ,溶液应澄清无色;如显浑浊  ,与1号浊度标准液(中国药典2000年版二部附录ⅨB)比较  ,均不得更浓;如显色  ,与黄色或黄绿色6号标准比色液(中国药典2000年版二部附录Ⅸ A 第一法)比较  ,均制砂机生产线不得更深 。
水分 输送带取本品  ,照水分测定法(中国药典2000年版二部附录Ⅷ M第一法A)测定  ,含水分不得过1.5% 。
有关物质取本品适量  ,加流动相制成每1ml中含0.5mg的溶液作为供试品溶液  ,vwin德赢网官方下载量取适量  ,加流动相稀释成管链式粉体输送机每1ml中含5μg的溶液作为对照溶液 。照含量测定项下的色谱条件测定 。量取对照溶液10μl  ,注入液相色谱仪  ,调节检测器灵敏度  ,使主成分拖尾峰(tailingpeak) 。前者少见 。>液相输送带色谱色谱峰的峰高约为满量程的20%  ,再准确量取上述两种溶液各10ml  ,分别注入液相色谱仪  ,记录色谱图至主成分峰保留时间的2倍 。供试品溶液的色谱图中如显杂质峰  ,单个杂质峰的基线构成之面积称峰面积 。A=×σ×h=2.507σh=1.064Wh/2h>峰面积不得大于对照溶液主成分峰的峰面积(1.0%)  ,各杂质峰峰面积总和(小于对照溶液主成分峰峰面积1/10的杂质峰不计)不得大于对照溶液石料破碎主成分峰峰面积的2.5倍(2.5%) 。
二氯甲烷 照氯相色谱法(中国药典2000年版二部附录V E) 测定  ,
色谱条件与系统适用性试验用6%氰丙基苯-94%二甲基硅氧烷基共聚物为固定相的毛细管色谱柱(30m×0.53mm,涂层厚3.0μm)  ,柱温为30℃(每次进样测定后  ,柱温升至100℃维持8分钟) 。称取二氯甲烷、丙酮和乙醇各适量  ,加水制成每1ml中各含0.4mg的溶液,作为分离度溶液  ,量取1μl  ,注入气相色谱仪 。二氯甲烷峰与乙醇峰、丙醇峰的分离度均应符合规定 。
取二氯甲烷适量  ,vwin德赢网官方下载称定  ,加水定量稀释制成每1ml中含40m g的溶液  ,作为对照溶液;另取本品约0.1g  ,vwin德赢网官方下载称定  ,vwin德赢网官方下载加水2ml  ,振摇使溶解  ,作为供试品溶液 。vwin德赢网官方下载量取上述两种溶液各1μl  ,注入气相色谱仪  ,记录色谱图 。供试品溶液的色谱图中如显与二氯甲烷对照溶液相应的色谱峰  ,按内标法以峰面积计算  ,含二氯甲烷的量不得过0.06% 。
细菌内毒素 取本品  ,依法检查(中国药典2000年版二部附录Ⅺ E)  ,每1mg头孢硫脒中含内毒素的量应小于0.075EU 。
无菌 取本品  ,分别加入100ml 0.9%无菌氯化钠溶液中使溶解  ,用薄膜过滤法处理后  ,依法检查(中国药典2000年版二部附录ⅪH)  ,应符合规定 。
【含量测定】 照高效液相色谱法(中国药典2000年版二部附录Ⅴ D)测定 。
色谱条件与系统适用性试验用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂;以磷酸盐缓冲液(取无水磷酸氢二钠2.76g,枸橼酸1.29g  ,加水溶解并稀释成1000ml)-乙腈(80:20)为流动相;检测波
长为254nm 。理论板数按头孢硫脒峰计算应不低于3000;取头孢硫脒对照品适量  ,加0.1mol/l盐酸溶液溶解并稀释成每1ml中含头孢硫脒2mg的溶液,置80℃水浴中加热10分钟  ,放冷  ,滤过  ,取续滤液10μl注入液相色谱仪  ,头孢硫脒峰与其降解产物峰的分离度应符合规定 。
测定法 取本品适量  ,vwin德赢网官方下载称定  ,加水溶解并定量稀释制成每1ml中含头孢硫脒0.1mg的溶液  ,取10μl注入液相色谱仪  ,记录色谱图;另取头孢硫脒对照品适量  ,同法测定 。按外标法以峰面积计算供试品中C19H28N4O6S2的含量 。

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